徕卡激光共聚焦显微镜技术特点
一、代表性技术
1. 高分辨率共聚焦成像
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True Confocal Scanning (TCS) 技术
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采用针孔共轭聚焦技术,有效排除离焦光干扰,实现XY轴分辨率达120 nm,Z轴分辨率达300 nm(油镜,488 nm激光)。
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支持AiryScan超分辨模式(分辨率提升1.7倍,接近STED水平)。
2. 多光谱检测与荧光分离
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HyD(Hybrid Detector)高灵敏度探测器
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量子效率>50%,比传统PMT灵敏度高10倍,适合弱荧光信号(如活细胞成像)。
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光谱拆分(LAS X Spectral Detection):自动分离重叠荧光信号(如GFP/mCherry共定位分析)。
3. 智能成像与自动化
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Adaptive Focus Control (AFC) 实时对焦系统
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长时间活细胞成像时自动补偿漂移(精度±50 nm),避免失焦。
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Matrix Screener高通量扫描
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自动定位多孔板/载玻片样本,适合药物筛选、组织芯片分析。
4. 多维动态成像
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时间序列(Time-lapse)+ 三维重构(3D Reconstruction)
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支持Z-Stack(0.1 μm步进)+时间轴(毫秒级间隔)组合,捕捉动态过程(如细胞迁移、钙离子波动)。
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FRAP/FLIP/FRET功能模块
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定量分析蛋白质流动性、相互作用(需选配)。
5. 多模态联用
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STED超分辨(可选):分辨率突破衍射极限(<50 nm)。
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DIC/相位差/明场:与共聚焦图像叠加,提供结构背景。
二、核心特点
1. 超高分辨率与灵敏度
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XY分辨率:120 nm(常规共聚焦),70 nm(AiryScan),30 nm(STED)。
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检测限:单分子荧光(HyD探测器)。
2. 活细胞友好设计
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低光毒性:白光激光(WLL)可调功率,减少光损伤。
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环境控制:可选CO?、温控、湿度模块(如STELLARIS 8)。
3. 高效数据处理
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LAS X软件平台:
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一键式多维图像拼接、去卷积、3D渲染。
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支持Python脚本自动化(如批量分析荧光强度)。
4. 应用领域广泛
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生命科学:
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神经元突触结构、线粒体动态、胚胎发育。
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医学研究:
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肿瘤微环境、免疫荧光病理切片。
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材料科学:
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纳米材料表面形貌、聚合物相分离。
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